ABSTRACT
Abstract In order to better understand the ossification processes in anurans our study was carried out on tadpoles and adults of Lithobates catesbeianus. In this sense, we characterized the kinetic properties of alkaline phosphatase with p-nitrophenylphosphatase (pNPP) and pyrophosphate (PPi) and evaluated the activities of tartrate-resistant acid phosphatase and acid phosphatase. The enzyme extracts were obtained from tadpoles and adult femurs, which were divided into epiphysis and diaphysis. After homogenization, the samples were submitted to differential centrifugation to obtain cell membranes and, further, to phospholipase C (PIPLC) treatment, to remove membrane-bound proteins anchored by phosphatidylinositol. The average of specific activity for pNPP hydrolysis (at pH 10.5) by alkaline phosphatase released by phosphatidylinositol-specific phospholipase C (PIPLC) from Bacillus cereus among different bone regions at different animal ages was 1,142.57 U.mg-1, while for PPi hydrolysis (at pH 8.0), it was 1,433.82 U.mg-1. Among the compounds tested for enzymatic activity, the one that influenced the most was EDTA, with approximately 67% of inhibition for pNPPase activity and 77% for PPase activity. In the case of kinetic parameters, the enzyme showed a "Michaelian" behavior for pNPP and PPi hydrolysis. The Km value was around 0.6mM for pNPPase activity and ranged from 0.01 to 0.11mM for PPase activity, indicating that the enzyme has a higher affinity for this substrate. The study of pNPP and PPi hydrolysis by the enzyme revealed that the optimum pH of actuation for pNPP was 10.5, while for PPi, which is considered the true substrate of alkaline phosphatase, was 8.0, close to the physiological value. The results show that regardless of the ossification type that occurs, the same enzyme or isoenzymes act on the different bone regions and different life stages of anurans. The similarity of the results of studies with other vertebrates shows that anurans can be considered excellent animal models for the study of biological calcification.
Resumo Para melhor compreender o processo de ossificação em anuros, nosso estudo foi conduzido em girinos e adultos de Lithobates catesbeianus. Nesse sentido, as propriedades cinéticas da fosfatase alcalina com p-nitrofenilfosfato (pNPP) e pirofosfato (PPi) foram caracterizadas, e as atividades enzimáticas das fosfatases ácida e ácida tartarato resistente foram avaliadas. Os extratos enzimáticos foram obtidos de fêmur de girinos e adultos, divididos em epífise e diáfise. Após a homogeneização as amostras foram submetidas à centrifugação diferencial para obter membrana celular e, em seguida, ao tratamento com fosfolipase C (PIPLC), para remover as proteínas de membrana ancoradas por fosfatidilinositol. A média da atividade específica da fosfatase alcalina, liberada pela PIPLC de Bacillus cereus, para a hidrólise de pNPP (pH 10,5) nas diferentes regiões do fêmur e idades dos animais foi de 1.142,57 U.mg-1, enquanto para a hidrólise do PPi (pH 8,0) foi de 1.433,82 U.mg-1. Entre os compostos testados para a atividade enzimática, o de maior influência foi o EDTA, inibindo aproximadamente 67% e 77% das atividades de pNPPase e PPase, respectivamente. Quanto aos parâmetros cinéticos, a enzima apresentou comportamento Michaeliano para a hidrólise dos dois substratos. O valor de Km foi de 0,6 mM para a atividade de pNPPase e variou de 0,01 a 0,11 para a atividade de PPase, indicando uma maior afinidade por esse substrato. O estudo da hidrólise de pNPP e PPi revelou que o pH ótimo aparente de atuação foi de 10,5 para o pNPP e 8,0 para o PPi, próximo ao fisiológico, sendo que esse é considerado o substrato natural da fosfatase alcalina. Os resultados demonstram que, apesar do tipo de ossificação que ocorre, a mesma enzima ou isoenzimas, atuam nos diferentes locais do osso e estágios de vida dos anuros. A similaridade dos estudos com os realizados com outros vertebrados apontam que os anuros podem ser considerados excelentes modelos animais para o estudo da calcificação biológica.
Subject(s)
Animals , Osteogenesis , Alkaline Phosphatase/metabolism , Rana catesbeiana , Bone and Bones/metabolism , KineticsABSTRACT
Abstract In order to better understand the ossification processes in anurans our study was carried out on tadpoles and adults of Lithobates catesbeianus. In this sense, we characterized the kinetic properties of alkaline phosphatase with p-nitrophenylphosphatase (pNPP) and pyrophosphate (PPi) and evaluated the activities of tartrate-resistant acid phosphatase and acid phosphatase. The enzyme extracts were obtained from tadpoles and adult femurs, which were divided into epiphysis and diaphysis. After homogenization, the samples were submitted to differential centrifugation to obtain cell membranes and, further, to phospholipase C (PIPLC) treatment, to remove membrane-bound proteins anchored by phosphatidylinositol. The average of specific activity for pNPP hydrolysis (at pH 10.5) by alkaline phosphatase released by phosphatidylinositol-specific phospholipase C (PIPLC) from Bacillus cereus among different bone regions at different animal ages was 1,142.57 U.mg-1, while for PPi hydrolysis (at pH 8.0), it was 1,433.82 U.mg-1. Among the compounds tested for enzymatic activity, the one that influenced the most was EDTA, with approximately 67% of inhibition for pNPPase activity and 77% for PPase activity. In the case of kinetic parameters, the enzyme showed a Michaelian behavior for pNPP and PPi hydrolysis. The Km value was around 0.6mM for pNPPase activity and ranged from 0.01 to 0.11mM for PPase activity, indicating that the enzyme has a higher affinity for this substrate. The study of pNPP and PPi hydrolysis by the enzyme revealed that the optimum pH of actuation for pNPP was 10.5, while for PPi, which is considered the true substrate of alkaline phosphatase, was 8.0, close to the physiological value. The results show that regardless of the ossification type that occurs, the same enzyme or isoenzymes act on the different bone regions and different life stages of anurans. The similarity of the results of studies with other vertebrates shows that anurans can be considered excellent animal models for the study of biological calcification.
Resumo Para melhor compreender o processo de ossificação em anuros, nosso estudo foi conduzido em girinos e adultos de Lithobates catesbeianus. Nesse sentido, as propriedades cinéticas da fosfatase alcalina com p-nitrofenilfosfato (pNPP) e pirofosfato (PPi) foram caracterizadas, e as atividades enzimáticas das fosfatases ácida e ácida tartarato resistente foram avaliadas. Os extratos enzimáticos foram obtidos de fêmur de girinos e adultos, divididos em epífise e diáfise. Após a homogeneização as amostras foram submetidas à centrifugação diferencial para obter membrana celular e, em seguida, ao tratamento com fosfolipase C (PIPLC), para remover as proteínas de membrana ancoradas por fosfatidilinositol. A média da atividade específica da fosfatase alcalina, liberada pela PIPLC de Bacillus cereus, para a hidrólise de pNPP (pH 10,5) nas diferentes regiões do fêmur e idades dos animais foi de 1.142,57 U.mg-1, enquanto para a hidrólise do PPi (pH 8,0) foi de 1.433,82 U.mg-1. Entre os compostos testados para a atividade enzimática, o de maior influência foi o EDTA, inibindo aproximadamente 67% e 77% das atividades de pNPPase e PPase, respectivamente. Quanto aos parâmetros cinéticos, a enzima apresentou comportamento Michaeliano para a hidrólise dos dois substratos. O valor de Km foi de 0,6 mM para a atividade de pNPPase e variou de 0,01 a 0,11 para a atividade de PPase, indicando uma maior afinidade por esse substrato. O estudo da hidrólise de pNPP e PPi revelou que o pH ótimo aparente de atuação foi de 10,5 para o pNPP e 8,0 para o PPi, próximo ao fisiológico, sendo que esse é considerado o substrato natural da fosfatase alcalina. Os resultados demonstram que, apesar do tipo de ossificação que ocorre, a mesma enzima ou isoenzimas, atuam nos diferentes locais do osso e estágios de vida dos anuros. A similaridade dos estudos com os realizados com outros vertebrados apontam que os anuros podem ser considerados excelentes modelos animais para o estudo da calcificação biológica.
ABSTRACT
Diversidade genética de Mycoplasma hyopneumoniae tem sido relatada em análise múltipla de repetições em tandem em número variável (MLVA). O objetivo deste estudo foi descrever a distribuição espacial e a heterogeneidade genética de tipos de M. hyopneumoniae no Brasil, bem como investigar a correlação entre regiões de repetição 1 (RR1) e 3 (RR3) de duas adesinas importantes (P97 e P146). Foram identificados 39 tipos de MLVA baseados no número de repetições em tandem em P97 RR1 e RR3 P146. A correlação negativa significativa (Spearman's rho = -0,26; P = 0,022) entre P97 RR1 e RR3 P146 foi observada, o que sugere um possível mecanismo compensatório que permitiria a bactéria manter a sua capacidade de adesão. Os resultados contribuem para compreender a epidemiologia das M. hyopneumoniae no quarto maior país produtor de suínos do mundo.(AU)
Subject(s)
Adhesins, Bacterial , Tandem Repeat Sequences , Mycoplasma hyopneumoniae/genetics , Pneumonia of Swine, Mycoplasmal/genetics , Swine/microbiologyABSTRACT
A total of 76 samples of Streptococcus suis isolated from meningitis cases in pigs from 2005 to 2009 were evaluated. The samples were collected from 3 to 21-week-old pigs raised in 30 farms located in Paraná state, Brazil. The samples of S. suis were obtained as part of routine procedures and were serotyped by coagglutination test using rabbit hyperimmune sera for the serotypes 1 to 9 and ½. S. suis type 2 was the most frequent, followed by serotypes 1, ½ and 3.
ABSTRACT
O objetivo deste estudo foi identificar a atividade inibitória de óleos de copaíba sobre o crescimento dos micro-organismos: Shigella flexneri, Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli, Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa, Citrobacter freundi, Staphylococcus aureus, Actinobacillus pleuropneumoniae e Haemophilus parasuis. Foi realizado um teste de difusão em ágar com duas soluções a 10 por cento de óleos de copaíba obtidos de duas diferentes espécies de copaíba (Copaifera officinalis e C. langsdorffii) e um controle negativo com tween 80 e água. Os isolados clínicos de H. parasuis e A. pleuropneumoniae foram incubados em microaerofilia. Os resultados mostraram três espécies Gram-negativas inibidas por ambas as soluções de óleo de copaíba: E. coli, P. aeruginosa e S. flexneri. Na inibição de P. aeruginosa o óleo de C. officinalis foi superior ao de C. langsdorffii (P<0,05). Todas as cepas de S. aureus tiveram seu crescimento inibido pelas soluções no ensaio, sem diferença estatística entre os halos. Estes resultados sugerem que o óleo de copaíba pode ser uma fonte potencial de compostos inibitórios para ser utilizada como antimicrobianos no tratamento de infecções humanas e animais e conservação de alimentos.
ABSTRACT
OBJETIVOS: Investigar a prevalência do medo de cair em uma população de idosos da comunidade e sua correlação com mobilidade, equilíbrio dinâmico, risco e histórico de quedas. MÉTODOS: Estudo transversal randomizado. Participaram do estudo 147 idosos com idades entre 60 e 92 anos, sendo 94 (65,95 por cento) mulheres e 53 (36,05 por cento) homens. O medo de cair foi avaliado usando FES-I-BRASIL (FIB), a mobilidade foi avaliada por meio do teste "Timed Up and go" (TUG), o risco de quedas, por meio do "Functional Reach Test" (FRT) e o equilíbrio dinâmico, pelo teste da Marcha Tandem (MT). RESULTADOS: Cento e trinta e três (90,48 por cento) idosos relataram medo de cair em pelo menos uma atividade, e 80 (54,42 por cento) dos idosos apresentaram histórico de quedas (HQ). A correlação de Pearson demonstrou resultado significante (p<0,001) do medo de cair com MT (r=-0,44248), FRT (r=-0,51562), HQ (r=0,54069), TUG (r=0,45738) e idade (r=0,39772). CONCLUSÕES: O presente estudo identificou alta prevalência de medo de cair nos idosos da comunidade, independente do HQ, e correlação significativa do medo de cair com mobilidade, equilíbrio dinâmico, risco e HQ.
OBJECTIVES: To investigate the prevalence of fear of falling among a population of older adults and its correlation with mobility, dynamic balance, risk and history of falls. METHODS: This was a randomized cross-sectional study. The participants were 147 older adults between the ages of 60 and 92: 94 women (65.95 percent) and 53 men (36.05 percent). Fear of falling was assessed using FES-I-BRAZIL (FIB); mobility, using the "timed up and go" (TUG) test; risk of falls, using the "functional reach test" (FRT); and dynamic balance, using the "tandem gait test"(TGT). RESULTS: One hundred and thirty-three older adults (90.48 percent) reported fear of falling in at least one activity and 80 older adults (54.42 percent) had a history of falls (HF). Pearson's correlation was statistically significant (p<0.001) between fear of falling and the TGT (r=-0.44248), FRT (r=-0.51562), HF (r=0.54069), TUG (r=0.45738) and age (r=0.39772). CONCLUSIONS: The present study identified high prevalence of fear of falling among older adults in the community, independent of their history of falls, and significant correlations between fear of falling and mobility, dynamic balance, risk and history of falls.
ABSTRACT
The fetal hemoglobin (HbF) levels and betaS-globin gene haplotypes of 125 sickle cell anemia patients from Brazil were investigated. We sequenced the Gg- and Ag-globin gene promoters and the DNase I-2 hypersensitive sites in the locus control regions (HS2-LCR) of patients with HbF level disparities as compared to their ßS haplotypes. Sixty-four (51.2 percent) patients had CAR/Ben genotype; 36 (28.8 percent) Ben/Ben; 18 (14.4 percent) CAR/CAR; 2 (1.6 percent) CAR/Atypical; 2 (1.6 percent) Ben/Cam; 1 (0.8 percent) CAR/Cam; 1 (0.8 percent) CAR/Arab-Indian, and 1 (0.8 percent) Sen/Atypical. The HS2-LCR sequence analyses demonstrated a c.-10.677G>A change in patients with the Ben haplotype and high HbF levels. The Gg gene promoter sequence analyses showed a c.-157T>C substitution shared by all patients, and a c.-222_-225del related to the Cam haplotype. These results identify new polymorphisms in the HS2-LCR and Gg-globin gene promoter. Further studies are required to determine the correlation between HbF synthesis and the clinical profile of sickle cell anemia patients.
Subject(s)
Adult , Child , Child, Preschool , Humans , Middle Aged , Anemia, Sickle Cell/genetics , Deoxyribonuclease I/genetics , Globins/genetics , Locus Control Region/genetics , Fetal Hemoglobin/analysis , Genotype , Genetic Markers/genetics , Haplotypes , Promoter Regions, GeneticABSTRACT
We investigated the effect of hyperprolactinemia by long-term domperidone treatment (10.0 mg/kg, single daily dose, ip) on striatal dopamine (DA) receptor sensitivity in male Wistar rats weighing 250-300 g(N=8). Domperidone treatment for days continued to produce an increased in serum concentration of prolactin (PRL) form 17.3 ñ 2.2 to 33.1 ñ 7.3 and from 16.8 ñ 2.3 to 21.9 ñ 2.1, 2 and 72 h after domperidone withdrawal, respectively. Hyperprolactinemia induced by long-term domperidone treatment did not change binding sites (B max) and dissociation constant (Kd) of [3***H]-spiroperidol binding when compared to controls. These results show that byperprolactinemia induced by long-term domperidone treatment does not effect the sensitivity of striatal DA receptors presumably because the effect of neuroleptic drugs is due to their interaction with the receptors and not to the concomitant hyperprolactinemia